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FOX文库构建

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FOX hunting system高通量筛选技术:

FOX hunting system(Full-length cDNA Over-expressing gene hunting system)是由Ichikawa等于2006年发展的一种功能基因选择性筛选技术,系统阐明植物基因功能。这种技术是通过在转基因植物中过量表达单个或有限数量的全长cDNA,产生大量显性突变,根据突变植株新的重要特征,鉴定转入基因的功能。 FOX hunting system使研究未知基因组序列植物的功能性基因成为可能。

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实验流程:

  • 对植物样品取样;

  • 提取样品RNA并构建均一化cDNA文库;

  • 连接植物表达载体并转化农杆菌,构建农杆菌FOX文库;

  • 浸染拟南芥等植物,构建植物FOX文库;

  • 筛选拟南芥差异的表型;

  • 克隆植株中过表达基因并回转验证。

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FOX hunting system筛选技术优势:

  • 可以利用突变体植株功能的增加进行分析;

  • 使研究未知基因组序列植物的功能性基因成为可能;

  • 能够在短时间内解析基因功能特性,缩短了研究周期。


在植物中应用实例:

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南京源宝生物科技有限公司

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