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酵母三杂交筛选系统(三个蛋白互作)

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服务详情

 

技术原理:

在酵母双杂交的筛选原理基础上改造,第一:使用pBrige载体,同时插入两个外源蛋白(N端融合Gal4系统中的BD结合域氨基酸多肽片段的蛋白X,上游有一个甲硫氨酸缺乏的时候使下游蛋白基因表达的Pmet25启动子且不融合任何标签的蛋白Y);第二:第三个蛋白Z克隆到pGADT7载体上;第三:通过酵母双杂筛选方式在甲硫氨酸缺陷型培养基进行结合筛选。

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专业服务优势:

一、文库选择优势:

   1.定制一库四用(单杂、双杂、三杂、过表达载体文库)的特色酵母文库:使用优化后的clonetech的pGADT7-Rec2、GATEWAY二次重组法和“一步法重组”文库;

   2.提供商品化酵母cDNA文库。

二、筛选服务优势:

酵母三杂交系统可研究三个蛋白三元或者蛋白/RNA之间的相互作用方式,筛选步骤优化,具有成熟的实验操作流程,提供真实可靠的实验数据及原始图片。

 

服务详情:

服务步骤

周期(工作日)

交付材料

价格

A、载体构建

3-15

1、诱饵质粒

2、自激活检测图片

3、验证图片+验证的AD质粒

4、项目报告

询价

B、自激活检测

10

C、转化酵母菌株

2-3

D、相互作用验证(同时设有阴性和阳性对照)

10

E、详细报告的整理和数据发送

1



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